Détection et caractérisation de clostridium perfringens isolé à partir de poulet de chair présentant des signes d'entérite nécrotique au niveau de la région de Tiaret

1 Laboratoire d’hygiène et de pathologie animale, université Ibn Khaldoun ,14000 Tiaret, Algérie. 2Laboratoire de recherche  « santé et production animales», Ecole nationale supérieure vétérinaire d’Alger, 16000 Alger, Algérie. 3 Veterinary Serum and Vaccine Research Institute, Cairo, Egypt. drmerachi@yahoo.fr RESUMÉ L’objectif de cette étude est de détecter la présence du Clostridium perfringens (Cl.perfringens) agent causal de l’entérite nécrotique (EN) chez le poulet de chair dans différentes régions au niveau de la wilaya de Tiaret et de caractériser les souches isolées pour la présence des gènes cpa, cpb .etx, iA et netB. Un total de 180 échantillons de contenu intestinal prélevés à partir de 70 élevages de poulet de chair (2 à 3 prélèvements par élevage) présentant des signes cliniques et des lésions évoquant une atteinte par l’EN , sur une période de 12 mois (aout 2015 à juillet 2016), ont été analysés par des méthodes classiques d’isolement bactériologique et par PCR. Cl.perfringens a été isolé avec un taux de 34,44% (62/180) et confirmé par les caractères morphologiques, culturels et biochimiques. Sur les 62 souches de Cl.perfringens , 83,87% (52/62) étaient toxigènes et 16,13% (10/62 ) étaient non toxigènes . La PCR multiplex a été utilisée sur les 52 souches toxigènes afin de détecter les types de toxines sécrétées. Toutes les souches étaient positives pour le gène cpa et négatives pour les gènes cpb, etx et iA , indiquant ainsi que toutes les souches toxigènes correspondaient au Cl.perfringens de type A à 100% (52/52) . Comme certaines études récentes ont mis en évidence un nouveau gène de virulence codant pour la toxine NetB, la PCR a été réalisée sur une sélection de 22 souches de type A afin de détecter ce dernier. Aucune souche n’a été positive pour le gène netB. Nos résultats indiquent que Cl.perfringens, agent causal de l’EN est détecté chez le poulet de chair au niveau de la région de Tiaret, et que toutes les souches toxigènes sont de type A avec une absence du gène NetB sur les souches sélectionnées. Ces résultats méritent d’être confirmés par d’autres investigations sur un plus grand nombre d’échantillons. ABSTRACT Detection and characterization of Clostridium perfringens isolated from necrotic enteritis in broiler chickens in Tiaret The present study was carried out to investigate the presence of Clostridium perfringens (Cl.perfringens) in broiler chickens at different locations in Tiaret province, western Algeria, and characterization of Cl.perfringens isolates for the presence of cpa ,cpb .etx, iA and netB gene. A total of 180 samples collected from 70 broiler chicken flocks (2 to 3 samples by flock) in a period of 12 months from august 2015 to July 2016 representing intestinal contents of broiler chickens showing clinical signs and lesions suspected to be NE were analyzed by conventional methods and PCR. C.perfringens was isolated at the rate of 34.44 % (62/180) confirmed by cultural and biochemical characterization, out of 62 C.perfringens isolates, 83.87% (52/62) isolates were toxigenic and 16.13 % (10/62) were non toxigenic. Multiplex polymerase chain reaction was performed for toxinotyping of the 52 toxigenic isolates, all isolates were positives for the gene cpa and negatives for cpb, etx and iA , indicating that all the toxigenic isolates were C.perfringens type A 100% (52/52). Recent studies have shown the involvement of NetB toxin in the pathogenesis of the disease, therefore, PCR was carried out on 22 types A isolates, and which showed that none of the isolates were positive for the gene netB. This result indicates that the C.perfringens causative agent of NE is detected in broiler chickens in Tiaret province and characterized by type A positive netB negative genotype. These results should be confirmed by further investigations on an important number of samples.